A infecção persistente com Pseudomonas …

A infecção persistente com Pseudomonas …

1 Western New York Respiratory Research Center, Departamento de Medicina, Divisão de pulmonar, Critical Care e Medicina do Sono da Universidade Estadual de Nova York em Buffalo Faculdade de Medicina e Ciências Biomédicas, Buffalo, Nova York e 2 Departamento de Anestesia e Assistência Perioperatória, Instituto cardiovascular Research, University of California, San Francisco, San Francisco, Califórnia

Correspondência e pedidos de cópias devem ser dirigidas a Ali A. El Solh, M.D. M.P.H. Divisão de pulmonar, Critical Care e Medicina do Sono, Erie County Medical Center, 462 Grider Street, Buffalo, NY 14215. E-mail: ude.olaffub@hlos

Abstrato

análise racional. Pseudomonas aeruginosa é uma das principais causas de bactérias Gram-negativas pneumonia associada ao ventilador (PAV) associados com uma taxa de mortalidade de 34 a 68%. Evidências recentes sugerem que P. aeruginosa em pacientes com VAP pode persistir no espaço alveolar, apesar da terapêutica antimicrobiana adequada. Nossa hipótese é que falha na erradicação P. aeruginosa a partir do pulmão é ligada ao sistema de tipo III secretora (SSTT) isolados.

MEDIDAS E RESULTADOS. Vinte e cinco dos 34 pacientes com PAV secretado pelo menos uma das proteínas de tipo III. Houve uma diferença significativa na taxa de apoptose de neutrófilos na VAP início entre essas cepas que secretadas citotoxinas e aqueles que não o fez. níveis de elastase de neutrófilos foram positivamente correlacionados com a taxa de apoptose (r 0,43, P 0,01). Apesar da terapia antimicrobiana adequada, 13 dos 25 isolados TTSS foram recuperados no dia 8 pós-VAP, Considerando que a erradicação foi alcançada em todos os pacientes que tinham níveis indetectáveis ​​de tipo III proteínas de secreção.

EM UM COMENTÁRIO OLHADA

Conhecimento científico sobre o assunto

pneumonia associada à ventilação devido à Pseudomonas aeruginosa tem sido associada com altas taxas de recaída, apesar da terapêutica antimicrobiana adequada.

O que este estudo acrescenta ao campo

A falha para erradicar P. aeruginosa em pneumonia associada ao ventilador está ligado a um sistema de secreção de tipo III, que está implicada na apoptose de neutrófilos alveolares.

MÉTODOS

estudo da População

Coleção de dados

Os dados clínicos gravados no registro do estudo incluíram idade, sexo, razões para ventilação mecânica, duração da ventilação mecânica antes do início do estudo, a terapia antibiótica antes, temperatura, contagem de leucócitos, proporção de PaO2 / I F O2 . tempo para a primeira dose de antibiótico a partir VAP início, a fisiologia aguda e na pontuação de saúde Avaliação II Crônica (23), eo múltiplo Score disfunção de órgãos (MODS) (24).

Recolha e processamento de amostras respiratórias

Análise do Tipo III secretora Fenótipo Proteína

Ensaio de citotoxicidade

neutrófilos apoptose

Análise estatística

As variáveis ​​contínuas foram comparadas por meio de Student não pareado t ou teste de Mann-Whitney você testar se as variáveis ​​não foram distribuídos normalmente. As variáveis ​​categóricas foram comparadas usando 2 testes com correção de Yates ou teste exato de Fisher, quando necessário. As correlações foram analisados ​​com correlação de Spearman. Os dados paramétricos são apresentados SD como média e os dados não paramétricos como medianas com intervalos de confiança de 95% ou intervalos. UMA P valor inferior a 0,05 foi determinada como significativo. Os cálculos foram realizados utilizando SPPS 12.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).

RESULTADOS

estudo da População

A análise de imunotransferência de exoenzimas L (ExoU), exos, e secreção PcrV a partir de um subconjunto da Pseudomonas aeruginosa isolados clínicos examinados.

Características de Tipo III secretora fenótipos

A tabela 1 resume as características clínicas de pacientes com Pseudomonas -Tipo III positivo fenótipos secretoras e aqueles com Pseudomonas -Tipo negativo III fenótipos secretoras. Não houve diferenças significativas entre os dois grupos em termos de idade, sexo, peso de co-morbidades, gravidade da hipoxemia, uso de antibióticos antes, tempo para a primeira dose de antibióticos, ou a gravidade da doença. Apenas a duração da ventilação mecânica antes VAP início foi significativamente maior nos pacientes que abrigavam isola capaz de tipo III secreção citotoxina.

As características clínicas da população estudada no momento DE Pneumonia Associada à Ventilação INÍCIO

Após examinar as características do LBA, os médios quantitativos contagem de colônias bacterianas e a percentagem de neutrófilos foram comparáveis ​​entre os dois grupos (Tabela 2). No entanto, o grau de apoptose neutrofílica foi significativamente aumentada em pacientes com Pseudomonas -Tipo III positiva em comparação com fenótipos secretoras Pseudomonas -Tipo negativo III fenótipos secretoras. Houve também uma diferença significativa nos níveis de níveis de elastase de neutrófilos entre os dois grupos. Além disso, o grau de apoptose neutrofílica foi positivamente correlacionada com os níveis da elastase bal (r 0,49, P 0,003; Figura 3 ).

Citotoxicidade de Tipo III secretora fenótipos

citotoxicidade de Pseudomonas aeruginosa isola para neutrófilos humanos. Exos exoenzimas S; ExoU exoenzimas U.

Implicações Clínicas de Tipo III secretora fenótipos

A BAL repetição no dia 8 de PAV início revelou a persistência de P. aeruginosa colónias no espaço alveolar em 13 (52%) dos 25 pacientes com tipo III fenótipos secretoras. A carga bacteriana variou de 2 outubro 1-junho 10 2 ufc / ml. Em comparação, nenhum dos pacientes com o tipo negativo III fenótipo secretor teve Pseudomonas isolados recuperados da cultura de BAL. Análise do padrão de secreção desses isolados revelou que nove tiveram o ExoU / PcrV e quatro tinham as Exos / fenótipos PcrV. Além disso, os ensaios revelaram BAL níveis mais elevados de elastase de neutrófilos no espaço alveolar, o que correspondeu a um grau avançado de em vitro citotoxicidade de neutrófilos naqueles pacientes com persistente Pseudomonas isola em comparação com os seus homólogos que tinham erradicado a bactéria (Figura 5).

DISCUSSÃO

Os resultados do presente estudo mostram que (1 ) VAP devido a P. aeruginosa Tipo III fenótipos secretoras foi associado com o aumento da apoptose de neutrófilos na Vivo e aumento da liberação de elastase de neutrófilos, (2 ) em vitro neutrófilos citotoxicidade significativamente correlacionada com a Pseudomonas ExoU / PcrV e Exos / fenótipos PcrV e (3 ) Do tipo III fenótipos secretoras positivos foram associados à infecção alveolar persistente e maior taxa de recaída, apesar de 7 dias de terapia antimicrobiana adequada.

A análise demonstrou que 71% de Pseudomonas isolados de pacientes com PAV eram capazes de segregar proteínas efectoras do tipo III. Em contraste com os pacientes com fibrose cística em que a taxa de tipo III secretoras isolados variou entre 12 e 27,5% (32. 33), as nossas observações estão de acordo com aqueles de outros investigadores, que observou que 77 a 91% dos pacientes com Pseudomonas porto VAP Pseudomonas estirpes que segregam proteínas TTSS (22. 34). Apesar de não ter examinado as construções genéticas TTSS destes isolados, os fenótipos dos isolados secretoras TTSS eram predominantemente quer ExoU / PcrV ou Exos / PcrV. Nenhum dos nossos isolados expressaram ambas as proteínas efetoras. Esta relação mutuamente exclusivo entre estas duas proteínas foi documentada anteriormente (22. 34), o significado de que ainda não está claro.

Em conclusão, Pseudomonas estirpes podem diferir acentuadamente em sua capacidade de causar infecções graves. A secreção de proteínas de secreção de tipo III parece ser um agente eficaz para induzir a apoptose- P. aeruginosa. permitindo que as bactérias persistem nos pulmões de hospedeiros susceptíveis. A prática actual de identificar género de bactérias ou de espécies pode ser insuficiente para caracterizar o potencial da doença, a duração do tratamento e as implicações de prognóstico desta bactéria.

Material suplementar

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